富有柿果实ACC合成酶3′末端的cDNA克隆

利用3′RACE的方法对柿果实ACC合成酶基因的3′末端进行扩增，扩增产物克隆到pMD18-TVector载体上，转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α，蓝白斑筛选重组质粒，并对插入片段进行序列测定。结果表明，3′RACE产物长912bp，开放阅读框内核苷酸序列编码251个氨基酸，此氨基酸序列含有ACC合成酶中3个高度保守区，GenBank中登录的DK-ACS1（登录号AB073005）序列只有一个的氨基酸不同。终止子后面的3′非编码区的长度为155bp，其中只有一个核苷酸与DK-ACS1的3′序列非编码区不同。序列分析结果显示，克隆的片段含有5′端GSPInnerPrimer和3′端为RACEInnerPrimer的引物。