OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.2006.05.015 , PP. 60-63
Keywords: 猪瘟病毒 ,杂交瘤 ,单克隆抗体 ,ELISA
Abstract:
采用单克隆抗体制备技术,建立了分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,液氮保存4年后复苏,细胞在HAT选择培养基中生长旺盛,分泌抗体稳定,分别命名为YNF1,YNF2,YNF3,YNF4,杂交瘤细胞染色体数介于96~115条。细胞培养上清和腹水的单抗间接ELISA效价分别为1:80~1:160和1:5000~1:10000。在间接ELISA和夹心ELISA检测中单抗与猪瘟病毒呈特异性反应,与正常的猪、兔肾组织提取液及其血清Ig无交叉。抗体蛋白属IgG类,亚类及轻链分别为IgG1/λ,IgG2a/κ,IgG2a/λ,IgG1/λ。结果表明,4株杂交瘤是分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的细胞株,可长期传代无限分泌单抗,是进一步研究猪瘟病毒和开发敏感、特异、快速诊断猪瘟试剂盒和试纸探针的免疫学特异性试剂来源。
References
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所.动物病毒学[M].北京:中国农业出版社,1999.
[2] Yang L,Yoon K J,Li Y,et al.Antigenic and variations of the 15 KD nucleocapsid protein of porcine reproductive and respiratory syndrome Virus isolates[J].Archives of Virology,1999,144:525-546.
[3] S.fazekas de st.groth,Doris scdeidegger.Production of monoclonal antibodies:strategy and tactics[J].Journal of Immunological Methods,1980,35:1-21.
[4] 马刚,李作生,余兴龙,等.猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析[J].中国兽医学报,2002,22(2):121-123.
[5] 金扩世,涂长春,殷震,等.猪瘟病毒保护性囊膜糖蛋白E1(gp55)基因研究进展[J].病毒学报,1996,12(3):287-289.
[6] 杜念兴.猪瘟的回顾与展望[J].中国畜禽传染病,1998,20(5):317-319.
[7] 裴天云,侯顺利,赵改敏,等.病毒提纯方法的比较试验[J].中国兽医科技,1995,25(7):21-22.
[8] 徐志凯.实用单克隆抗体技术[M].西安:陕西科学技术出版社,1991:77-82.
[9] 吴胜昔,姜平,李玉峰.抗猪IgM单克隆抗体的研制[J].中国免疫学杂志,2005,21(10):784-785.
[10] 肖毅,梅其柄,侯颖,等.抗PH-SA单克隆抗体相对亲和力的测定[J].细胞与分子免疫学杂志,2005,21(5):657-660.
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