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西瓜SRAP-PCR反应程序的建立与体系的优化
DOI: 10.7668/hbnxb.2008.03.011
Keywords: 西瓜 ,SRAP ,体系优化
Abstract:
以西瓜品种中华拳王为试材,探索了西瓜SRAP-PCR反应程序,并对西瓜SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行了梯度设置试验,筛选和建立了可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应程序和体系。反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,35℃退火1min,72℃延伸1min,共5个循环;94℃变性1min,50℃退火1min,72℃延伸1min,共35个循环;72℃延伸5min;4℃保存。反应体系(Total为15μL):DNA100ng,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,Primer60ng,Taqpolymerase0.75U。结果表明,该程序和体系能很好地满足西瓜基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于西瓜遗传研究是可行的。
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