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ISSN: 2333-9721
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香菇纤维素酶基cel6B的克隆及表达

DOI: 10.7668/hbnxb.2011.03.009, PP. 42-46

Keywords: 香菇,纤维素酶,cel6B基因,刚果红,RT-PCR

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Abstract:

以液体PDA中培养的香菇菌丝体为材料,提取香菇总RNA,通过RT-PCR方法,克隆得到纤维素酶基因cel6B,并成功构建了原核表达载体pET28a-cel6B;将该载体转人大肠杆菌BL21(DE3)中,构建工程菌,用IPTG诱导蛋白质的表达.SDS-PAGE电泳结果表明:在IPTG诱导下,cel6B基因编码出46.4kDa的蛋白质CEL6B.将工程菌在CMC-Na(羧甲基纤维素钠)为唯一碳源的刚果红液体培养基中培养7d后,培养基红色变浅,初步证明纤维素酶CEL6B具有分解纤维素的能力.

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