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ISSN: 2333-9721
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猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

DOI: 10.7668/hbnxb.2011.01.002, PP. 6-10

Keywords: 猪Fc&gamma,RⅢ受体,&gamma,,共转染,Marc145细胞

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Abstract:

为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(PorcineFcgammareceptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300mg/L)和G418(400mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合。

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