乙酸铅诱发人肾小管上皮细胞线粒体损伤的体外研究

［目的］研究铅对人肾小管上皮细胞（humankidneycells，HK-2）线粒体的损伤作用，并探讨其可能的作用机制。［方法］以不同浓度的乙酸铅处理体外培养的HK-2细胞，罗丹明123（rhodamine123，Rh123）及10-壬基吖啶橙（10-nonylacridineorange，NAO）结合荧光化学发光仪分别检测细胞线粒体膜电位及心磷脂水平，细胞免疫荧光法结合流式细胞术检测线粒体细胞色素c（cytochromec，Cytc）释放情况，加甘露醇观察铅对心磷脂及Cytc变化的影响。［结果］乙酸铅能造成HK-2细胞线粒体膜电位剂量及时间依赖性下降，荧光强度从正常对照组的4.56±0.25下降到400μmol/L组的2.90±0.26或从正常对照组的4.44±0.20下降到12h组的2.34±0.50，与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。乙酸铅能明显造成HK-2细胞线粒体心磷脂NAO荧光强度时间及剂量依赖性下降，荧光强度从正常对照组的2.45±0.18下降到400μmol/L组的0.91±0.18或从正常对照组的2.52±0.01下降到24h组的1.50±0.05，与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。乙酸铅能诱发线粒体Cytc释放，剂量及时间依赖性地降低细胞内Cytc荧光强度。50μmol/L甘露醇能使NAO荧光强度从1.38±0.14恢复至2.30±0.15，将Cytc荧光强度从9.49±0.31恢复至14.20±0.39，明显抑制铅对心磷脂的氧化及Cytc的释放。［结论］铅可能早期通过HK-2细胞线粒体膜电位溃散，造成线粒体功能损害，进一步加强线粒体心磷脂的氧化损伤，促使Cytc释放，造成线粒体的结构损伤。