全氟辛酸特异性单域重链抗体的制备

：［目的］基于抗原抗体特异性结合的原理，制备一种针对全氟辛酸（PFOA）小分子的特异性抗体，以用于PFOA的现场快速检测。［方法］采用碳二亚胺法将PFOA与牛血清白蛋白（BSA）偶联，将此完全抗原作为包被抗原，用重链抗体噬菌体文库进行筛选获得阳性克隆，聚合酶链反应扩增重链抗体片段并与含有人抗体Fc段的质粒连接，采用原核表达系统进行抗体蛋白表达和纯化，间接竞争酶联免疫吸附试验（ELISA）进行验证。［结果］成功合成完全抗原PFOA-BSA，偶联比为8。采用重链抗体库进行4轮筛选，获得7株阳性克隆，经进一步的原核表达系统进行蛋白表达和纯化，得到5种与预期大小相符的、含有人抗体Fc段的抗体蛋白。经间接竞争ELISA方法初步检测验证，获得1个可与PFOA特异结合的单域重链抗体。［结论］最终获得针对PFOA的特异性抗体，有望用于建立快速检测不同介质中PFOA的免疫学检测方法。