二硫化碳对大鼠睾丸组织细胞凋亡线粒体通路的影响及环孢素A的干预作用

［目的］研究二硫化碳（carbondisulfide，CS2）对大鼠睾丸生殖细胞凋亡线粒体通路的影响及其可能的分子机制，同时观察环孢素A（cyclosporinA，CsA）对细胞凋亡的干预作用。［方法］选取清洁级雄性SD大鼠48只并随机分为6组：对照组、3个CS2染毒组（50、250、1250mg/m3）、干预组［CS2（1250mg/m3）+CsA（12.5mg/kg）］和CsA（12.5mg/kg）组。静式吸入染毒，每天2h，每周5d，共10周，对照组仅吸入新鲜空气，CsA则依据大鼠体重并按相应比例先溶解在牛奶中然后灌胃。染毒结束后取睾丸组织做HE染色，观察其形态学改变；TUNEL荧光法检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况；WesternBlot法检测各组细胞色素C（CytC）、半胱氨酸天冬氨酸酶原9（Procaspase-9）、Procaspase-3、Bcl-xL抗凋亡和促凋亡蛋白Bad的表达含量。［结果］随着CS2染毒浓度的增加，HE染色大鼠睾丸组织形态损伤情况不断加剧，中、高浓度组的凋亡指数高于对照组（P<0.05），CsA干预对大鼠睾丸组织形态损伤有一定缓解；与高浓度CS2染毒组相比，干预组的凋亡指数明显下降（P<0.05），但仍高于CsA组（P<0.05）。CS2染毒组CytC、Bad蛋白含量与对照组比较有所增加，而Procaspase-9、Procaspase-3和Bcl-xL蛋白含量则有下降的趋势（P<0.05）。CsA干预后与高浓度CS2染毒组比较，干预组CytC蛋白含量下降（P<0.05），Bcl-xL蛋白含量则提高（P<0.05）；Procaspase-9、Procaspase-3和Bad蛋白含量均有不同程度的变化，但与CS2高浓度组相比差异无统计学意义。［结论］CS2染毒可影响细胞凋亡线粒体通路继而诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡，而细胞凋亡线粒体通路相关蛋白的表达可能与CsA的干预有关。