人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定

用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)反应合成了交联抗原GRb1BSA(GRb1与BSA的结合比为10∶1)和GRb1OVA(GRb1与OVA的结合比为8∶1)。以GRb1BSA为免疫原，分5次免疫3只BALB/C小鼠，取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，Hat筛选，有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA（酶联免疫吸附测定）间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1∶16000，并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系，分别命名为1F7和1G3，单抗检测显示在0.01～1μg/mL呈线性关系，GRb1的检测范围达50～350ng/mL，两株单抗针对相同的抗原决定簇，制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。