miR-21对宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性的影响

目的：探讨miR-21与宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性之间的关系，阐明miR-21对细胞凋亡和自噬改变的可能作用机制。方法：人宫颈癌HeLa细胞分为假照组和4Gy照射组，分别转染miR-21NC（阴性对照）、miR-21mimics、miR-21inhibitorNC和miR-21inhibitor。实时荧光定量PCR检测照射前和照射后miR-21的表达水平；集落形成实验观察miR-21对HeLa细胞辐射敏感性的影响；流式细胞术检测细胞凋亡和自噬细胞百分率；采用生物信息学方法预测miR-21的靶基因；荧光素酶报告基因分析验证miR-21与靶基因3′UTR的结合；Westernblotting法检测相关蛋白beclin1表达水平。结果：与假照组比较，4Gy照射组miR-21表达水平明显增加(P<0.05）；集落形成实验，与miR-21NC组比较，miR-21mimics组HeLa细胞辐射敏感性无明显变化(P>0.05）；与miR-21inhihitorNC组比较，miR-21inhibitor组HeLa细胞辐射敏感性无明显变化(P>0.05）；与miR-21NC+4Gy组比较，miR-21mimics+4Gy组HeLa细胞凋亡率明显增加(P<0.05）；与miR-21inhibitorNC组比较，miR-21inhibitor组HeLa细胞凋亡率明显减少（P<0.05）。与miR-21NC组比较，miR-21mimics组自噬率升高（P<0.05）。与miR-21NC+4Gy组比较，miR-21mimics+4Gy组自噬率升高（P<0.05）;与miR-21NC+4Gy组比较，miR-21mimics+4Gy组beclin1蛋白表达水平增加（P<0.05）。结论：发现了miR-21新的靶基因beclin1。过表达miR-21促进辐射诱导的凋亡和自噬，但对于宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性无直接影响。［关键词］miR-21；宫颈肿瘤；HeLa细胞；辐射敏感性；细胞凋亡；自噬