辐射诱发胸腺淋巴瘤Kras基因的表达及其启动子甲基化

目的：研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Kras基因mRNA和蛋白表达的变化，并检测其启动子CpG岛甲基化状态，探讨辐射致癌的发生机制。方法：采用X射线照射30只BALB/c小鼠，建立胸腺淋巴瘤动物模型，取胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织，分别提取总mRNA、合成cDNA和总蛋白，采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Westernblotting法分别检测Kras基因mRNA和蛋白表达水平，采用硫化测序PCR(BSP)法检测Kras基因启动子CpG岛甲基化状态。结果：RT-PCR法检测，胸腺淋巴瘤Kras基因mRNA相对表达水平明显高于正常胸腺组织（P<0.01）；Westernblotting法检测，胸腺淋巴瘤Kras基因蛋白表达水平高于正常胸腺组织近1.41倍；BSP法检测，正常胸腺组织Kras基因启动子有4个CpG位点发生甲基化，而辐射诱发胸腺瘤Kras基因启动子有1个CpG位点发生甲基化，呈去甲基化状态。结论：电离辐射可能通过Kras基因启动子去甲基化而引起Kras基因mRNA和蛋白表达水平改变，进而导致肿瘤的发生，其可能是辐射致癌的发生机制之一。