hTERT启动子调控的TRAIL基因表达载体的构建及其对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的：构建hTERT启动子调控的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因表达载体，探讨其对肝癌细胞SMMC7721和肝细胞HL7702增殖的抑制作用。方法：采用分子生物学方法构建重组质粒pshuttle-TRAIL和pshuttle-hTERT-TRAIL，经PCR和酶切鉴定正确后，通过脂质体转染SMMC7721和HL7702细胞，同时转染pcDNA3.1+-GFP并用荧光显微镜检测转染效率。MTT法检测重组质粒对细胞增殖变化的影响。结果：成功构建重组质粒pshuttle-TRAIL和pshuttle-hTERT-TRAIL，荧光显微镜检测结果显示：质粒与脂质体的比例为1∶3时细胞转染效率最高。pshuttle-hTERT-TRAIL组SMMC7721细胞增殖抑制率从16h开始明显增加，与对照组比较差异有显著性（P<0.001），且从24h开始与pshuttle-TRAIL组比较细胞增殖抑制率明显增加（P<0.05）；但重组质粒对HL7702细胞增殖抑制率无影响。结论：hTERT启动子调控的TRAIL可明显抑制肝癌细胞的增殖，而对人肝细胞的增殖无影响，其作用效果明显优于TRAIL单基因治疗。