沉默视黄酸核受体α损伤大鼠原代海马神经元的钙兴奋性

目的：了解视黄酸核受体α(RARα)对大鼠神经元功能的必要性。方法：采用组织消化原代贴壁法分离培养大鼠原代海马神经元，利用腺病毒载体特异沉默RARα；利用Real-TimePCR分析沉默RARα对神经元视黄酸(RA)信号各受体以及神经细胞标志物的影响；利用活细胞钙影像分析沉默RARα对神经元钙兴奋性的影响。结果：免疫荧光显示，分离培养的细胞90%表达神经元标志神经元特异性烯醇化酶(NSE)，腺病毒转染效率可达80%。PCR结果显示，RARα沉默后RARα表达降低75%(P<0.01)，其他受体均显著降低(P<0.01)，但RARβ显著上调(P<0.05)。活细胞钙影像显示，沉默组钙兴奋性显著降低(P<0.05)，全反式视黄酸(ATRA)预处理24h能显著增强钙兴奋性(P<0.01)。结论：RARα的缺失能显著降低原代海马神经元的神经元标志物NSE的表达，并显著损伤神经元的钙兴奋性。