SCIRR10截短体真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的：构建SCIRR10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统，探讨SCIRR10蛋白的功能位点。方法：PCR扩增出SCIRR10蛋白的3个功能截短体表达DNA序列，构建3种真核表达质粒载体pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR10(1-145aa)、pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR10(1-90aa)和pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR10(1-70aa)。将3个表达载体质粒转染到COS-7细胞中，应用Westernblotting方法检测3个蛋白截短体的表达情况。结果：3个被截短的SCIRR10蛋白相对分子质量分别为18800、12800和10700。在COS-7细胞中可以成功表达3个SCIRR10蛋白截短体。相对3个SCIRR10截短体蛋白的表达量，β-tubulin蛋白无明显变化。结论：成功构建SCIRR10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统，通过此系统获得有生物活性的3个SCIRR10截短体蛋白。