HPLC法测定清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量方法的建立及评价

目的：建立高效液相色谱(HPLC)法测定清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量的新方法，优化清热通淋片质量的检测和控制。方法：采用HPLC法。以苦参碱、氧化苦参碱标准品为对照品，清热通淋片为样品。使用Agilent1200高效液相色谱仪，色谱柱Genimi-C18(5μm，4.6mm×250mm)，流动相为磷酸盐缓冲液（pH=3.0）-甲醇(93∶7)，流速为0.8mL/min，柱温为35℃，检测波长为220nm，进样量为10？μL。通过对HPLC法进行线性关系、专属性、稳定性、精密度、重复性和准确度试验以进行方法学考察。结果：苦参碱回归方程为Y=1102.1X+15.423，其进样量在0.3118～4.6770μg范围内呈良好线性关系（r=0.999　9），平均加样回收率为97.1%，RSD=0.24%(n=6)；氧化苦参碱回归方程为Y=1106.6X+5.0402，其进样量在0.0298～0.4464μg范围内呈线性关系(r=0.999　6)，平均加样回收率为98.4%，RSD=1.52%(n=6)。在稳定性、精密度和重复性实验中，苦参碱和氧化苦参碱的RSD值分别为1.21%、1.47%；0.13%、2.76%；0.48%（苦参碱和氧化苦参碱之和的RSD）。结论：HPLC方法分离效果好、专属性强、简便、灵敏和准确，可作为清热通淋片中苦参碱和氧化苦参碱含量的测定方法。