巴斯德毕赤酵母表达的人抑瘤素M发酵条件及发酵产物分析

目的：研究巴斯德毕赤酵母表达的人抑瘤素M（hOSM）大规模发酵条件。方法：利用hOSM毕赤酵母高表达菌株，于试管水平进行发酵pH条件的摸索，以补料分批培养方式在80L发酵罐中对hOSM工程菌进行3个批次的高密度发酵，控制和优化各种发酵条件，通过SDS-PAGE对发酵产物进行分析。结果：最终确定在pH5.0的FM21培养基中扩增菌体，待菌体密度达190g/L时添加甲醇诱导，在发酵液pH5.5的条件下，发酵温度稳定在28℃，通入空气的流量为2vvm，转速为650r/min，罐内压力为10P，溶解氧保持在25%左右，甲醇流加速度在9.3mL/h/L初始发酵液体积，诱导36h时结束发酵，hOSM占分泌总蛋白的28%，产量达到280mg?L-1。结论：应用hOSM工程菌能够进行稳定的发酵，为进行下一步生物学功能测定提供充足的物质基础。