内皮祖细胞灌注供心延长心脏移植物存活时间的实验研究

目的研究供体内皮祖细胞（endotherialprogenitorcell，EPC）灌注供心对同种异体心脏移植物生存时间的影响。方法获取SpragueDawley（SD）大鼠的骨髓细胞，通过密度梯度离心法分离培养单个核细胞，取贴壁细胞选择性诱导培养2周以上，获取内皮祖细胞（EPC）。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法鉴定EPC。20只体重200～250g的雄性SD大鼠为供体，20只体重200～250g的雌性Wistar大鼠为受体，分为4组，每组5对。组I：术后不使用环胞霉素；组II：术后7d每天使用环胞霉素5mg/kg；组III：术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞1×106个，术后不使用环胞霉素；组IV：术中供心经冠脉灌注内皮祖细胞，术后7d每天使用环胞霉素5mg/kg。观察各组供心存活时间。结果贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展，5d形成集落，7~10d增殖加速并出现条索状结构，2周大部分细胞呈多角形。Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双染，免疫荧光染色阳性率大于70％。组I、II、III、IV各组供心平均存活时间分别为6.2±0.8、11.6±1.1、9.4±1.1和18.8±1.6d。组II、III、IV移植物的平均存活时间较组I显著延长（P<0.05）。结论内皮祖细胞灌注合并环胞霉素运用可以延长大鼠心脏移植物的存活时间。