携带Lipocalin2的溶瘤腺病毒抑制胰腺癌生长的实验研究

目的构建携带人Lipocalin2基因且删除E1B55基因的溶瘤腺病毒,研究其体外对胰腺癌细胞生长的抑制作用。方法利用RT-PCR技术获得Lipocalin2基因并克隆至pCA13质粒,构建pCA13-lipocalin2。用BglII从pCA13-lipocalin2酶切出包含CMV启动子及Lipocalin2的表达框,将该表达框亚克隆入质粒pZD55,获得pZD55-lipocalin2。将pZD55-lipocalin2与pBHGE3共转染293细胞，重组产生携带Lipocalin2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin2。经PCR和Westernblot鉴定正确后，体外采用结晶紫染色和MTT法，观察其对胰腺癌细胞生长的抑制作用。结果ZD55-lipocalin2能在PANC-1细胞中增殖复制并表达Lipocalin2蛋白，结晶紫染色和MTT法观察到该溶瘤腺病毒能明显抑制PANC-1细胞生长。结论成功构建了携带人Lipocalin2的溶瘤腺病毒,其能明显抑制胰腺癌细胞生长，为胰腺癌治疗提供新策略。