基于表位多肽的抗TRIM22抗体的制备及其初步应用

目的制备抗TRIM22多肽抗体及鉴定其性能。方法将TRIM22N端15个氨基酸的多肽（MDFSVKVDIEKEVTC）与钥孔嘁血蓝蛋白（KLH）偶联，免疫新西兰白兔制备抗血清；将TRIM22多肽与Affi-Gel10偶联制备免疫亲和层析柱,兔抗血清经亲和层析纯化后得到TRIM22多肽特异性抗体；采用ELISA测定抗体效价、Westernblot来鉴定抗体特异性，并利用该抗体通过间接免疫荧光实验来检测TRIM22蛋白的细胞内定位。结果获得了抗TRIM22特异性抗体。Westernblot结果显示该抗体能特异识别真核及原核表达的TRIM22蛋白。利用该抗体进行的间接免疫荧光实验发现TRIM22蛋白主要定位在HepG2细胞核中。结论该抗体的制备为TRIM22分子的功能研究提供了有力的工具。