促肝细胞再生磷酸酶-3基因对大肠癌细胞侵袭和失巢凋亡的调控

目的探讨促肝细胞再生磷酸酶（phosphataseofregeneratinglivercell-3，PRL-3）基因对大肠癌细胞侵袭的影响及可能机制。方法应用PRL-3基因小干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）转染处理人大肠癌HCT116细胞后，分别采用荧光实时定量RT-PCR和Westernblot检测PRL-3mRNA和蛋白水平，分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力，采用琼脂糖凝胶电泳和YUNEL检测癌细胞失巢凋亡情况。结果转染组癌细胞PRL-3mRNA和蛋白水平明显被抑制，且与时间和浓度相关。与对照组比较，转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少，且呈时间和浓度依赖性。琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示，转染组细胞出现明显的凋亡现象：凋亡指数增加，出现明显的DNA条带。结论PRL-3基因、siRNA转染可明显抑制大肠癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭，其机制可能与诱导失巢凋亡有关。