神经生长因子受体阳性的人食管鳞癌细胞的分选及其干细胞特性

目的应用免疫磁珠分选(magneticactivatedcellsorting,MACS)人食管鳞癌细胞(esophagealsquamouscarcinomacell,ESCC)中的神经生长因子受体(nervegrowthfactorreceptor,NGFR)阳性细胞,并对其肿瘤干细胞样特征进行研究。方法采用免疫磁珠分选技术分选人食管鳞癌细胞系中的NGFR阳性细胞,然后通过流式细胞仪法测定分选细胞的纯度及细胞周期分布,并计算细胞回收率;MTT法测定细胞数,绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间;平板克隆实验测定平板克隆形成率;裸鼠接种成瘤实验测定体内致瘤性,从而鉴定NGFR阳性ESCC的干细胞特性。结果NGFR阳性细胞约占肿瘤细胞的1.89%,经过磁珠分选后,其纯度显著提高,达89.94%,细胞回收率为19.83%。与未分选细胞相比,NGFR阳性细胞的增殖速度明显提高,生长曲线左移,细胞倍增时间缩短［(25.22±8.15)hvs.(47.41±12.69)h,P<0.05］,平板克隆形成率显著增加(16.27%±8.31%vs.1.22%±0.35%,P<0.05),处于活跃增殖期S、G2、M期的细胞显著增加(72.7%vs.18.8%,P=?);裸鼠皮下接种的转移瘤形成率增加(8/10vs.1/10,P=?),转移瘤重量显著增加［0.72±0.53)gvs.(0.16±0.26)g,P<0.05］。结论应用免疫磁珠分选技术能有效分选出人食管鳞癌细胞中的NGFR阳性细胞,NGFR阳性细胞具有肿瘤干细胞特性。