工程化同种胰岛移植治疗1型糖尿病小鼠的实验研究

目的将外源蛋白FasL修饰的供者胰岛移植于糖尿病小鼠肾包膜下，观察其治疗1型糖尿病的效果。方法采用ProtExTM技术将嵌合蛋白SA-FasL修饰于供者小鼠胰岛，流式细胞检测蛋白的表达；以近交系小鼠BALB/c和C57BL/6分别为胰岛移植的供受者，进行同种小鼠胰岛移植，部分受者联合免疫抑制剂雷帕霉素（rapamycin，RPM）治疗，从手术当日开始应用RPM（0.2mg/kg），连续治疗10天。根据移植胰岛的不同及有无联合RPM治疗将受者分为5组：(1)SA-FasL修饰组（FasL组，n=33）；(2)SA-FasL修饰+RPM治疗组（FasL-RPM组，n=31）；(3)SA修饰组（SA组，n=27）；(4)SA修饰+RPM治疗组（SA-RPM组，n=30）；(5)未修饰胰岛组（Islet组，n=20）。术后连续3天测定血糖，其后每周测定尿糖3次。若受者尿糖阳性并连续2天血糖≥250mg/dL为移植排斥反应，尿糖阴性超过100天为移植胰岛长期存活。结果激光共聚焦显微镜观察生物素呈绿色，FasL蛋白呈红色表达于胰岛表面，胰岛细胞的平均生物素化效率为（90.8±0.9）%，FasL蛋白平均表达率为（82.6±2.2）%。FasL组中28%受者的移植胰岛获得长期存活，联合应用RPM之后（FasL-RPM组）长期存活率提高到92%，两组间差异有显著统计学意义（P<0.05）；SA组于术后25天全部受者均发生排斥反应，移植胰岛平均存活时间（meansurvivaltime，MST）为（16±1.5）天，联合应用RPM之后（SA-RPM组）21%受者的移植胰岛获得长期存活，但显著低于FasL-RPM组的存活率（P<0.05）。Islet组于术后22天全部受者均发生排斥反应，移植胰岛MST为（14±1.7）天。结论表达FasL嵌合蛋白的工程化胰岛移植于糖尿病小鼠并联合短程免疫抑制剂治疗，有可能诱导移植胰岛长期存活，对1型糖尿病的治疗具有潜在的临床意义。