脾切除对重度热伤诱导的大鼠肠黏膜屏障破坏的影响

目的研究脾切除对重度热伤大鼠肠黏膜屏障的影响。方法80只Wistar大鼠,随机分成对照组、热伤组(B组),热伤+脾切除7天组(B+SP7组)和热伤+脾切除14天组(B+SP14组)。对照组置于25℃水浴;热伤组于92℃水浴造成30%III度烫伤;热伤+脾切除组在热伤同时行脾切除,分别于伤后7天及14天抽血后处死。检测血清内毒素、核因子κB(nuclearfactorκB,NF-κB)和肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)含量;病理图像分析仪观察末端回肠的形态学变化,并采用Westernblot法检测小肠黏膜上皮紧密连接蛋白1(zonulaoccludens1,ZO-1)和闭锁蛋白(occludin)的表达。结果B组大鼠血清内毒素［(1.071±0.29)EU/mL］、NF-κB［(125±14.1)pg/mL］和TNF-α［(99.1±18.1)μg/mL］含量较对照组分别上升301%、247%和608%(P<0.01),B+SP7组较对照组分别增加226%、168%和370%,差异有统计学意义(P<0.01)。B+SP14组仅血清TNFα较对照组上升445%,上升幅度高于7天组(P<0.01)。形态学上热伤组小肠黏膜明显萎缩,平均肠绒毛高度和黏膜厚度较对照组下降明显(P<0.01)。切除脾脏7天和14天后,平均肠绒毛高度和黏膜厚度的下降幅度小于热伤组(P<0.01)。用图像采集系统定量分析Westernblot条带的相对光密度值,热伤后ZO-1(0.56±0.17)和闭锁蛋白(1.30±0.27)均明显下降(P<0.01);相对于对照组,B+SP7组的下降幅度小于热伤组(均P<0.01),B+SP14组仅闭锁蛋白的下降幅度小于B+SP7组。结论严重热伤损伤小肠黏膜屏障,脾切除后短期内由于其释放的细胞因子减少,无脾动物肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白表达恢复,肠屏障的损害减轻。