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复旦学报(医学版) 2014
靶向干扰CXCR7基因表达对肝癌(HCC)细胞增殖及凋亡的影响DOI: 10.3969/j.issn.16728467.2014.02.004, PP. 161-167 Keywords: 肝细胞肝癌(HCC),CXCR7基因,短发夹状RNA(shRNA),增殖能力,细胞凋亡 Abstract: 目的探讨CXCR7基因在不同肝癌细胞系及肝癌组织中的表达情况,并研究靶向抑制CXCR7基因表达对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。方法应用Westernblot检测不同肝癌细胞系及10例肝癌组织中CXCR7蛋白的表达水平。采用短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)干扰技术沉默HCCLM3与MHCC97L细胞中CXCR7基因的表达,分别采用WesternBlot和qRTPCR检测shRNA的靶向沉默效果。通过CCK-8增殖实验与AnnexinV-FITC/PI细胞双染色研究CXCR7抑制对HCCLM3与MHCC97L增殖及凋亡的影响。结果CXCR7表达水平与肝癌细胞的恶性程度呈正相关,肝癌组织中CXCR7表达水平较癌旁显著升高。实验成功构建了9个慢病毒表达载体,其中CXCR7shRNA566序列干扰效率最高。增殖实验显示干扰表达组细胞生长速度受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪分析显示干扰CXCR7表达可诱导细胞凋亡的发生。结论CXCR7表达水平与肝癌恶性程度呈正相关,靶向干扰CXCR7表达可抑制细胞的增殖能力,诱导细胞发生凋亡。
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