超顺磁氧化铁标记对干细胞转铁蛋白受体基因和蛋白表达的影响

目的探讨超顺磁氧化铁(SPIO)标记对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)内转铁蛋白受体(TfR)基因和蛋白表达的影响，及SPIO标记与TfR表达的剂量－效应关系。方法从3周龄雄性SD大鼠脂肪组织中提取干细胞，用多聚赖胺酸(PLL)介导SPIO(质量浓度分别为12.5～、25～、50～、75～、100～μg/mL，PLL/SPIO为1∶0.03)标记大鼠ADSCs12h后，用普鲁士蓝染色、台盼蓝及噻唑蓝法(MTT)试验检测SPIO标记率、细胞活力及增殖力，并用逆转录聚合酶链反应(RT－PCR)、Westernblot技术检测各质量浓度SPIO标记细胞内TfR表达情况。结果PLL介导SPIO可以简单、高效地标记大鼠ADSCs。当SPIO终质量浓度为25～100μg/mL时，SPIO标记率达到近100%;各质量浓度SPIO标记可抑制细胞增殖，但对细胞活力没有明显影响。SPIO标记大鼠ADSCs内TfR表达水平下调，其中TfRmRNA表达量以标记后24h时最低，TfR蛋白表达量以标记后7d时最低。随着SPIO标记质量浓度的增加，TfR表达水平越低，持续时间越长，但当SPIO标记质量浓度达25μg/mL及以上时，TfRmRNA表达维持在一定的水平。结论PLL介导SPIO可以简单、高效的标记大鼠ADSCs。PLL介导SPIO标记可引起大鼠ADSCs内TfR表达水平暂时性降低以减少对细胞外铁的摄取，且随着SPIO标记质量浓度的增加，TfR表达水平越低，低水平表达持续时间越长。