Cdk5及p35在NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡中的作用研究

目的探讨Cdk5及p35在神经生长因子(NGF)撤退诱导的PC12细胞凋亡中的作用机制。方法建立NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡模型，Westernblotting检测Cdk5及p35在凋亡过程中表达变化情况，利用Cdk5特异性抑制剂Roscovitine预处理已分化PC12细胞，检测其对NGF撤退诱导的凋亡作用影响，向已分化PC12细胞转染真核表达质粒pCMV-p35-IRES-Cdk5，检测过表达Cdk5/p35对PC12细胞凋亡的影响。结果NGF撤退36h会引起已分化PC12细胞出现典型的DNALadder凋亡特征，MTT检测结果也显示，NGF撤退对PC12细胞的损伤呈时间依赖性;Roscovitine预处理已分化PC12细胞可以抑制NGF撤退诱导的细胞凋亡率，但不影响Cdk5/p35蛋白表达水平;向已分化PC12细胞中转染真核表达质粒后，能检测到Cdk5/p35蛋白的过表达，并引起PC12细胞出现凋亡样改变。结论Cdk5及p35的活化与NGF撤退诱导的已分化PC12细胞凋亡过程密切相关，抑制Cdk5的活化有抑制细胞凋亡保护神经元的作用。