人ＺＰ３的Ｎ端肽的体外表达

目的为了深入研究透明带的功能，体外表达人ＺＰ３的Ｎ端肽段。方法通过ＰＣＲ克隆人ＺＰ３的第７７～７０３的ＤＮＡ序列，利用该片段构建ｈＺＰ３的Ｎ端肽的原核表达载体，转化大肠杆菌Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３）进行体外表达，利用分离的表达产物免疫小鼠，通过ＥＬＩＳＡ检测抗体反应，利用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ和免疫组化检测抗血清与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结果Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示，获得了约２７ｋｕ的重组蛋白，用该蛋白免疫小鼠获得了抗体滴度近２００００的抗血清，该抗体能与重组透明带蛋白和人卵巢天然的透明带蛋白的特异反应。结论成功表达人ＺＰ３的Ｎ端重组肽，表达产物具有免疫原性。