大黄５种蒽醌类成分在大鼠肝微粒体中的代谢及酶促反应动力学

摘要 研究大黄５种蒽醌类成分在大鼠肝微粒体中的代谢特征和参与代谢的细胞色素Ｐ４５０亚型．超速离心法制备大鼠肝微粒体，采用反相高效液相色谱（ＲＰ-ＨＰＬＣ）测定孵育液中大黄５种蒽醌类成分的质量浓度，研究大黄蒽醌类成分的酶促动力学，推导药物米氏常数（Ｋｍ）和最大反应速度（Ｖｍａｘ），并计算体外酶对药物的清除率（Ｃｌｉｎｔ）；用苯巴比妥钠（ＰＢ）、地塞米松（ＤＥＸ）、β-奈黄酮（β-ＮＦ）诱导大鼠肝微粒体，观察大黄５种蒽醌类成分在各温孵体系中的代谢，同时观察不同质量浓度和不同种类的ＣＹＰ酶特异性抑制剂对大黄蒽醌类成分代谢的影响．结果表明大黄芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚在肝微粒体中的Ｋｍ、Ｖｍａｘ、Ｃｌｉｎｔ分别为（１８.９７±１.８９）、（２.５０±０.１１）、（１５.６８±１.０９）、（１８３.４１±１.９０）、（１.３７±０.１４）ｍｇ·Ｌ－１；（０.５２±０.０１５）、（０.０６６±０.００３）、（０.４１±０.００９）、（５.２２±０.０９）、（０.０３６±０.００３４）ｍｇ·Ｌ－１·ｍｉｎ－１；（２.６９±０.１２）、（２.５６±０.１６）、（２.６１±０.２０）、（２.８１±０.１０）、（２.６３±０.１８）ｍｉｎ－１·１０－２；经ＤＥＸ、ＰＢ、β-ＮＦ诱导后，ＰＢ组、ＤＥＸ组大黄蒽醌类成分代谢率高于ＣＭＣ-Ｎａ组，具有显著性差异（Ｐ＜０.０５），β-ＮＦ组大黄蒽醌类成分代谢率低于ＣＭＣＮａ组，无显著性差异（Ｐ＞０.０５）；非那西汀、氟康唑、酮康唑的Ｄｉｘｏｎ图均为一组相交于第二象限的直线．通过研究得知大黄５种蒽醌类成分在ＰＢ、ＤＥＸ诱导的肝微粒体中代谢较快，ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ａ６为介导大黄蒽醌类成分代谢的主要代谢酶；非那西汀、氟康唑、酮康唑均为为大黄蒽醌类成分的竞争性抑制剂．