DJ-1真核表达载体构建及其转染口腔癌细胞的表达

目的构建人DJ-1真核表达载体pcDNA3.1(+)/DJ-1，并转染人口腔癌细胞系Tca8113，建立含有DJ-1真核表达载体的口腔癌细胞模型。方法以人HEK293细胞为模板，应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法扩增人DJ-1基因全长，与真核表达载体pcDNA3.1重组，经酶切鉴定和测序分析后，通过脂质体介导法转染人口腔癌细胞系Tca8113，并设立空质粒对照组（转染pcDNA3.1空载体）和未转染组，最后采用RT-PCR法检测Tca8113细胞中DJ-1基因的表达情况。结果RT-PCR法获得长度为500bp左右的阳性产物，重组质粒后经酶切鉴定和序列分析证实真核表达载体pcDNA3.1/DJ-1构建成功。转染Tca8113细胞后RT-PCR法证实与空质粒组和未转染组相比，转染真核表达载体pcDNA3.1/DJ-1的细胞系中DJ-1基因表达明显增高。结论成功构建人真核表达载体pcDNA3.1/DJ-1，并建立含有该载体的口腔癌细胞模型，为进一步研究DJ-1基因在口腔癌中的功能及应用DJ-1进行基因治疗奠定基础。