水飞蓟宾联合５-ＦＵ抑制胃癌ＭＧＣ-803细胞增殖及机制

目的研究水飞蓟宾联合5-氟尿嘧啶（5-FU）抑制胃癌MGC-803细胞增殖，探讨其协同增效作用及机制．方法采用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度的水飞蓟宾对人胃癌MGC-803细胞，人正常肝L02细胞的增殖抑制作用，并计算IC20，IC50；采用IC20浓度的水飞蓟宾联合不同浓度的5-氟尿嘧啶，观察对人胃癌MGC-803细胞增殖抑制作用；水飞蓟宾单独或联合5-FU作用于胃癌MGC-803细胞，碘化丙锭（PI）单染色检测细胞周期改变，AnmexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平，Westerblotting检测细胞周期和凋亡相关蛋白的表达．结果MTT法检测显示，水飞蓟宾对胃癌NGC-803细胞有增殖抑制作用，且呈剂量－效应关系，对人正常肝L02细胞增殖抑制作用较弱．水飞蓟宾作用于胃癌MGC-803细胞48H的IC20，IC50浓度分别为144.6\214.7μ,mol/L；水飞蓟宾与不同浓度的5-氟尿嘧啶联合作用于MG803细胞48H,可提高MGC803细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性，增敏5.73倍．流式结果显示，无论是单独使用水飞蓟宾、5-氟尿嘧啶还是水飞蓟宾与5-氟尿嘧啶联合使用都能使细胞抑制在G0/G1期和出现凋亡细胞群；Westerblotting结果显示，水飞蓟宾与５氟尿嘧啶联合使用，能使细胞的细胞周期相关蛋白P15表达升高，CDK6表达下降，BC1-2蛋白家族中抗凋亡蛋白BC1-2，BCL-XL表达明显降低，促凋亡蛋白Bax表达基本不变，Casepase9,Casepase3活化降解．结论水飞蓟宾提高胃癌MGC-803细胞对5-FU的敏感性，水飞蓟宾在联合5-FU之后能够使MGC-803细胞抑制在G0/G1期，并通过线粒体凋亡途径使细胞发生凋亡．