重楼活性单体ＰＰ-２６抑制结肠癌ＳＷ６２０细胞增殖并诱导细胞凋亡

摘要 目的：探讨重楼活性单体ＰＰ-２６对人结肠癌ＳＷ６２０细胞增殖抑制作用及其机制．方法：采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体ＰＰ-２６对人结肠癌ＳＷ６２０细胞增殖抑制作用；ＰＩ单染及ＡｎｎｅｘｉｎＶ-ＦＩＴＣ／ＰＩ双染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测ＰＰ-２６对细胞周期、细胞凋亡相关蛋白以及Ａｋｔ和ＥＲＫ蛋白的表达．结果：与正常肝ＬＯ２细胞相比，重楼单体ＰＰ-２６能显著抑制ＳＷ６２０细胞的生长，作用呈剂量－效应关系；随着ＰＰ-２６浓度的增加，细胞克隆形成逐渐减少，与细胞对照组相比有显著差异；不同浓度ＰＰ-２６作用后，细胞阻滞于Ｇ１期；ＰＰ-２６作用细胞２４ｈ后，ＣＤＫ４、ＣＤＫ６表达下降，Ｐ１５、ｃｙｃｌｉｎＤ１表达增加；不同浓度ＰＰ-２６作用后，细胞晚期凋亡率增加，随浓度增加有上升趋势；ＰＰ-２６作用细胞２４ｈ后，线粒体相关凋亡信号通路蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-９、Ｃａｓｐａｓｅ-３表达下降，ＰＡＲＰ切割条带增加，细胞促凋亡蛋白Ｂａｘ的表达增加，抗凋亡蛋白Ｂｃｌ-２和Ｂｃｌ-ｘＬ减少，ｐ-Ａｋｔ和ｐ-ＥＲＫ蛋白表达均下降．结论：重楼活性单体ＰＰ-２６通过上调ｐ１５促进结肠癌ＳＷ６２０细胞阻滞于Ｇ１期，通过抑制Ｐ１３Ｋ／Ａｋｔ信号通路及ＥＲＫ信号通路，活化线粒体凋亡通路，诱导细胞凋亡．