细粒棘球蚴重组HSP70基因的表达、纯化及免疫学鉴定
, PP. 140-142
Keywords: 细粒棘球蚴 ,热休克蛋白HSP70 ,表达 ,纯化 ,免疫鉴定
Abstract:
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcusgranulosus，？Eg？)热休克蛋白70(Heatshockprotein，HSP70)基因的重组质粒并原核表达、纯化及对其免疫特性进行鉴定。方法从重组质粒HSP70/pGEM-T中酶切HSP70目的片段，亚克隆入表达载体pET-28a，转化入大肠杆菌E？coliBL？？21？(DE3)plysS进行融合表达，经His-band树脂纯化试剂盒小量纯化，SDS-PAGE和Westernblot方法鉴定表达产物。结果成功构建？Eg？？HSP70/pET-28a/E？coliBL？？21？基因工程菌株，诱导表达重组蛋白和纯化分离得到14kDa？Eg.？HSP70均能被细粒棘球蚴天然抗原免疫的兔多克隆抗血清识别。结论初步证实该重组蛋白具有较好的抗原性。？
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