羊软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定

目的从羊肋软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法选择羊肋软骨为原料经脱脂、脱钙后,用盐酸胍去除蛋白多糖,经胃蛋白酶消化、氯化钠盐析等步骤,提取纯化蛋白,然后进行鉴定。结果4mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖,用胃蛋白酶的限制性酶解结果满意;氯化钠盐析浓度为3mol/L时最佳。SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的蛋白与Sigma公司的Ⅱ型胶原蛋白一致。Ⅱ型胶原蛋白最大吸收峰为212nm。结论从羊肋软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,且符合II型胶原蛋白的特征。