OPA在线柱前衍生化HPLC-FLD法测定人血浆中硫酸阿米卡星的浓度

目的建立一种新的在线柱前衍生化HPLC-FLD法测定血浆中的阿米卡星。方法血浆样品碱化后用乙腈沉淀蛋白,上清液用OPA程序在线衍生化后进样分析。色谱柱AgilentXDB-C18(5μm,4.6mm×150mm);流动相甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠(70∶30,pH=3.67);荧光检测λex=342nm,λem=440nm;流速1.0mL/min;柱温40℃;样品盘温度10℃;进样量10μL;衍生化时间1min。结果该法测定血浆中阿米卡星定量下限为1mg/L,线性范围在1~50mg/L(r=0.9993);日内、日间RSD小于11%,绝对回收率大于90%,相对回收率大于95%。结论本法准确、灵敏、易于操作,可用于阿米卡星的血药浓度测定及药动学研究。