赖氨酰氧化酶基因原核表达克隆的构建

目的克隆编码人赖氨酰氧化酶(hLOX)的基因片段,并构建含有该基因的重组原核表达质粒,为制备基因工程化的重组hLOX奠定基础。方法从人皮肤成纤维细胞中抽提RNA,通过RT-PCR扩增LOX编码序列(750bp),所得目的基因插入原核表达载体质粒pET28a,转化大肠杆菌DH5α。重组质粒pET28a-hLOX经双酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果载体质粒pET28a中插入的基因片段与hLOX基因序列完全相同。结论成功构建含有人LOX基因的重组表达质粒。