原代培养嗅鞘细胞与异种神经支架共培养研究

目的探讨体外环境下原代培养的嗅鞘细胞与异种神经支架能否共同存活。方法应用改良差速贴壁联合胰酶限时消化的方法分离培养大鼠乳鼠的嗅鞘细胞,对培养后的细胞进行鉴定;取青紫蓝兔胫神经1.0cm,化学方法萃取;对萃取后异种神经进行HE染色和S-100免疫组织化学染色;在体外将嗅鞘细胞与神经支架进行共培养,通过扫描电镜观察细胞与支架的共存情况;ELISA检测单纯嗅鞘细胞(对照组)、细胞与支架共培养(实验组)在3、5、7、9d不同时间点上神经生长因子分泌上是否存在差异。结果应用改良方法纯化的嗅球细胞经原代培养能够获得较高纯度的嗅鞘细胞,细胞纯度能够达到70%;萃取后的异种神经支架镜下未见雪旺氏细胞和髓鞘结构,神经基底膜、内膜、束膜和外膜均存在;嗅鞘细胞能够贴附生长在异种神经支架上;实验组与对照组在3、5、7、9d神经生长因子分泌量上的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论原代培养的嗅鞘细胞能够贴附在异种神经支架上生长;嗅鞘细胞单独生长与共培养时神经生长因子的分泌没有差异,异种神经支架与细胞有很好的组织相容性,没有干扰细胞本身的生长特性。