ELISA法、荧光免疫法及PCR检测婴幼儿腹泻常见病毒

目的了解不同方法学检测婴幼儿腹泻常见病毒的检测结果差异及一致性情况。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光法（四联法）及聚合酶链式反应（PCR）技术筛查深圳市福田区引起临床婴幼儿急性腹泻的轮状病毒（RV）、肠道腺病毒（EAdV）、诺如病毒（NV）和星状病毒（AstV）的抗原，并将检测结果数据进行对比。结果酶免法与荧光免疫法检测数据对比对RV,NV,EAdV的抗原阳性检出率差异有统计学意义（P0.05）；两种方法对RV的检测结果具有较好的一致性（Kappa值为0.558），对NV,EAdV和AstV的检测结果一致性较差（Kappa值分别为0.142,-0.025和0.361）；ELISA法和PCR检测数据对比ELISA法除对EAdV阳性检出率低于PCR外，对其他3种病毒的阳性检出率均高于PCR，且经χ2检验显示两种方法对4种病毒的阳性检出率差异均有统计学意义（P0.75），对EAdV的检测结果一致性较好（Kappa值为0.537）；荧光免疫法（四联法）和PCR检测数据对比除AstV外，两种方法对其他3种病毒的阳性检出率差异均有统计学意义（P<0.05）。对RV的检测结果具有很好的一致性（Kappa值为0.764），对EAdV的检测结果一致性较好（Kappa值为0.452），NV和AstV的检测结果一致性差（Kappa值分别为0.181和-0.017）。结论ELISA法和荧光免疫法（四联法）对腹泻病毒的检测，除轮状病毒外，其它病毒检测结果的一致性较差，只可用于腹泻病原的初步筛查，确认必须进一步做培养或分子诊断；ELISA法、荧光免疫法（四联法）与PCR三者间的阳性检出率差异均有统计学意义，ELISA法与PCR检测结果的一致性明显较好。以PCR检测结果作为评估标准，ELISA法对四种腹泻病毒抗原的检测灵敏度、特异性及准确性均优于荧光免疫法，荧光免疫法检测结果的假阳性率较高。