人肺炎衣原体LAMP快速检测方法的建立

目的采用环介导等温扩增（LAMP）技术建立针对人肺炎衣原体基因的特异、灵敏、快速、可视的检测方法。方法对GenBank登录的肺炎衣原体的Omp1基因序列进行生物学分析,利用PrimerExplorerV4软件,针对保守区域设计LAMP引物,建立并优化反应条件,对其特异性、灵敏度和稳定性进行评估。结果该方法能特异性扩增出肺炎衣原体,而对流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、人腺病毒、人博卡病毒均无特异反应,其最低检测限度为50copies/μL。另外,反应周期可在50min内完成,并通过反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化判读。结论本研究建立的针对人肺炎衣原体的LAMP检测方法具有特异性强、灵敏度高、简便快速、可视化判读结果、成本低等优势,为基层或现场进行肺炎衣原体的快速确诊提供了可靠的技术支撑。