烟酸羟基化酶产生菌的快速筛选及催化条件

建立了一种基于紫外显影法快速筛选烟酸羟基化酶产生菌的方法，用96孔板培养菌后，将菌液点样到滤纸上，利用6-羟基烟酸在紫外光照射(300nm)下显影的特性，可以快速、方便地筛选出烟酸羟基化酶产生菌.对筛选出的最高酶活菌株BKC4进行了研究，菌株为杆状，革兰氏染色呈阴性，通过16SrRNA序列分析鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonasputida).利用BKC4菌株催化烟酸合成6-羟基烟酸，结果表明，BKC4菌株烟酸羟基化酶的最适催化条件为底物浓度10g/L，温度37℃,pH6.5，摇床转速200r/min，酶在低于30℃及pH6.0~6.5范围内较稳定.