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ISSN: 2333-9721
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阴离子型双功能含环氧基团酶固定化载体的制备及其固定辣根过氧化酶

Keywords: 辣根过氧化酶,固定化酶,甲基丙烯酸缩水甘油酯,对羟基苯磺酸钠,静电相互作用

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Abstract:

利用接枝聚合在微米级硅胶微粒表面的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和对羟基苯磺酸钠(SHBS)发生环氧基团的部分开环反应,制得阴离子型双功能复合载体SHBS-PGMA/SiO2,研究了辣根过氧化酶(HRP)与载体SHBS-PGMA/SiO2间的静电相互作用在共价固定HRP过程中的作用及其机理.结果表明,在较大的pH值范围内,复合载体SHBS-PGMA/SiO2表面携带高密度负电荷,pH=6.0时HRP分子荷正电,酶蛋白分子与载体间会产生强静电相互作用,显著促进HRP的固定化;当载体表面SHBS的键合率约为18%时,静电相互作用对固酶的促进作用最强,固定化酶的偶联率和比活力最高.离子强度对酶的固定化也有很大影响,加入NaCl对载体与酶蛋白之间的静电相互作用力产生屏蔽作用,增大NaCl浓度可使固定化酶的偶联率和比活力降低.

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