在大肠杆菌中表达蝮蛇毒类凝血酶基因gloshedobin
Keywords: 蛇毒类凝血酶,包涵体,表达,金属离子,正交实验
Abstract:
将大连蛇岛蝮蛇毒腺中的类凝血酶基因gloshedobin克隆到pET-32a(+)上，构建了T7启动子控制的大肠杆菌表达质粒，并考察了质粒的稳定性.采用IPTG诱导，以融合蛋白的形式进行表达，得到以包涵体形式存在的类凝血酶.通过实验对诱导时间、诱导温度及诱导剂浓度进行了优化，并采用正交实验考察了金属离子对表达的影响，结果表明Fe3＋,Co2＋对类凝血酶的表达有促进作用.
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