极端条件驯化法提高腈水合酶产生菌的丙烯酰胺耐受性

为了提高产腈水合酶的菌体Nocardiasp.对催化产物丙烯酰胺的耐受性，利用极端条件改造了现有的丙烯酰胺生产菌株RS，通过向发酵液间歇加入丙烯腈催化生成丙烯酰胺，为菌体制造出一个极端环境，使菌体在生长催化过程中逐渐适应高浓度丙烯酰胺，强化其丙烯酰胺耐受性，驯化得到了RS-1菌株.研究了驯化过程中菌体存活率、比死亡速率和腈水合酶活性随丙烯酰胺浓度的变化.在不同的丙烯酰胺初始浓度(0~400g/L)下比较了两菌株的丙烯酰胺耐受性，RS-1菌体催化丙烯腈水合的速率都大于RS菌体，平均提高30.8%；而且RS-1菌株的胞内腈水合酶也具有较好的丙烯酰胺耐受性.在相同的水合条件下，RS-1菌株催化所得的丙烯酰胺终浓度和丙烯腈转化率分别为587.1g/L和99.97%，都明显优于RS菌株的水合结果.在进一步的水合实验中，RS-1菌株催化所得的丙烯酰胺终浓度达到了641.4g/L.