argE基因的表达优化及Zn2+添加时间和浓度的影响机制分析

确定了目的基因argE在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中的表达位置，研究了Zn2+对重组菌生长及表达产物活性的影响，并分析了影响机制.结果表明，argE可在重组菌中高效表达，表达产物N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶大多以不可溶的包涵体形式存在，只有少量为有活性的可溶性表达.1.0g/L的Mg2+对重组菌的生长及酶活有明显促进作用.Zn2+加入时机及加入量不同，影响结果也不同.发酵起始加入Zn2+严重抑制菌的生长及酶活，而在1.0%乳糖诱导2.5h后加入则可解除生长抑制并提高酶活.SDS-PAGE电泳及活力测定证实Zn2+参与形成酶的催化中心，对酶的表达量没有影响.