红平红球菌LSSE8-1中辅因子再生系统的构建

采用PCR方法从红球菌Rhodococcussp.RHA1基因组中克隆了编码甲酸脱氢酶的基因(fdh)，将该基因片段插入大肠杆菌-红球菌穿梭质粒pBS306，构建了甲酸脱氢酶表达质粒pBS-PFG，转入专一性脱硫菌R.erythropolisLSSE8-1，得到重组菌LSSE8-1-FDH.2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色反应测得重组菌LSSE8-1-FDH的总脱氢酶活(OD496)为0.464，原始菌LSSE8-1的总脱氢酶活(OD496)为0.353，重组菌比原始菌酶活增加了31%.考察了不同浓度甲酸根对R.erythropolisLSSE8-1与重组菌LSSE8-1-FDH生长的影响，当甲酸根浓度为25mmol/L时重组菌LSSE8-1-FDH的生长最佳.油水相静息细胞脱硫实验表明，重组LSSE8-1-FDH菌比宿主菌的脱硫速率增加了12.5%，总脱硫率增加了约20%.