渤海湾天津沿岸海水中甲肝病毒的检测和定量

甲肝病毒（hepatitisAvirus,HAV）是能引起传染性甲型肝炎的单链RNA病毒.用常规RT-PCR（反转录PCR）和SYBRGreen实时定量RT-PCR方法，根据甲肝病毒保守的VP1-VP2基因序列设计引物，对渤海湾天津沿岸海水中的甲肝病毒进行了检测和定量分析.9个样品取自渤海湾天津塘沽以南沿岸海水，取样时间分别是2007年夏、秋、冬季和2008年春季.海水样品先用小型超滤装置（MilliporePelliconMiniTFF）或超滤离心管（MilliporeCentriconPlus-70）浓缩，然后进行RT-PCR检测.结果表明，从9个海水样品中都能扩增出192bp的HAVcDNA，这些cDNA的核苷酸序列与GenBank中的同源序列相似性为95%～100%.用SYBRGreen实时定量RT-PCR检测了春季和冬季的6个海水样品，结果表明，海水中甲肝病毒的浓度范围为5.35×106～4.51×107virusparticles/L.