氯代邻苯二酚1，2-双加氧酶基因的克隆及其定量表达

从1，2，4-三氯苯降解菌铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)J5-2的总DNA中，利用PCR方法克隆到氯代邻苯二酚1，2-双加氧酶基因，命名为tcbC(J5-2)(GenBank登录号EF111021).分析tcbC(J5-2)基因的氨基酸序列后发现，该基因不同于已见报道的1，2，4-三氯苯降解菌Pseudomonassp.P51中的氯代邻苯二酚1，2-双加氧酶基因tcbC(P51)，与其同源性仅为95%.tcbC(J5-2)基因在48、52和73这3个关键位置的氨基酸分别为Leu(亮氨酸)、Ala(丙氨酸)和Ile(异亮氨酸)，而tcbC(P51)基因分别为Val(缬氨酸)、Ala(丙氨酸)和Met(蛋氨酸).利用实时荧光定量反转录-PCR(real-timereversetranscription-PCR)方法，考察了菌株J5-2在分别以1，2-二氯苯、1，3-二氯苯和1，2，4-三氯苯为唯一碳源时tcbC(J5-2)基因的定量表达.结果表明，1，2，4-三氯苯对tcbC基因的诱导作用更强.