1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与原核表达

大肠杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶被yqhD的基因编码，能催化羟基丙醛生成1,3-丙二醇。采用PCR方法从大肠杆菌中扩增到yqhD，测序结果显示该片段大小为1164bp。将目标片段克隆到原核表达载体pET28（α+）中并转化到大肠杆菌Novablue，经IPTG诱导后，SDS-PAGE电泳鉴定，结果表明克隆得到的yqhD基因能在大肠杆菌Novablue-pET28中实现蛋白表达；在25℃条件下，IPTG诱导12h后，1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到124U/mg，而野生型的酶活力仅为1.4U/mg；重组菌全细胞发酵结果显示，产物1,3-丙二醇的产率能达到65%，而野生型仅为9.5%。