双孔色谱介质的制备和质粒DNA快速色谱纯化

以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体,二甲基丙烯酸乙二酯为交联剂,环己醇与十二醇为有机致孔剂,200g/L的碳酸钙悬浮液为内水相(超孔致孔剂),用二次乳化法制备了(W/O)/W乳液,通过紫外光引发悬浮聚合生成两类孔型高分子微球(DEA-B).DEA-B孔径为双峰分布,范围分别为50～200nm和500～5000nm.其体积平均粒径、湿密度与不含超孔的微孔介质(DEA-M)接近.在流速为0.5mL/min(150cm/h)及相同的洗脱条件下,比较了所制备的微孔色谱介质填充的色谱柱与双孔色谱介质填充的色谱柱对5.4kb质粒DNA的分离效果.结果表明,仅双孔介质色谱柱可以纯化质粒DNA,并且可以在1500cm/h的高流速下得到色谱纯的质粒DNA,证明该双孔色谱介质可以用于质粒DNA的高速分离.