栝楼蛋白2:栝楼蛋白部分化学结构的初步测定

栝楼蛋白(Trichobitacin)是从栝楼(TrichosantheskirilowiiMaxim,Cucurbitaceae)中新发现的核糖体失活蛋白,分子量为27,228;pI为9.6。应用基质辅助的激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和快原子轰击质谱法(FAB-MS)分别测定胰蛋白酶酶解栝楼蛋白和天花粉蛋白(Trichosanthin)的混合肽质谱,通过比较发现了一些分子量相同的肽。由于这两种蛋白质都来源于栝楼块根,同源性比较强,所以这些肽序列在两种蛋白质中基本一样;再结合蛋白N-端自动顺序仪测定栝楼蛋白N-端的结果,确定了栝楼蛋白N-端38个氨基酸的顺序,栝楼蛋白经胰蛋白酶酶解后所得肽段用HPLC分离纯化,再用蛋白质自动顺序仪,DABITC/PITC双偶合手工法和质谱法共确定了栝楼蛋白N-端,C-端等100多个氨基酸残基的序列。