桑蚕丝素-RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析

利用基因工程方法把含有短肽RGD的氨基酸序列连接到桑蚕丝素蛋白的结晶序列GAGAGS上,通过调节DNA的聚合度,合成了具有[TGRGDSPA(GVPGV)2GG(GAGAGS)3AS]n一级结构、不同分子量大小的桑蚕丝素-RGD融合蛋白,并且通过在M9培养基中添加[3-13C]Ala的方法进行融合蛋白的稳定同位素标记.13CCP/MASNMR结果显示,融合蛋白中的GAGAGS部分具有与天然桑蚕丝素结晶部分相同的分子结构,即SilkI处理后为均一的分子结构,而SilkII处理后为不均一的分子结构,它包含了三种不同的结构成分.另一方面,通过对小鼠成纤维细胞BALB/3T3在不同蛋白材料载体上的粘附和增殖性能的测定结果显示,融合蛋白对细胞的增殖性能与天然胶原蛋白相近,但表现出了比胶原蛋白更好的细胞粘附性能.该研究结果显示,如果对该桑蚕丝素-RGD融合蛋白进行适当加工,可能适合于组织工程支架材料的应用.